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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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BT-474 [BT474]細胞
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:E0105
  • 價格: ¥2020/株
  • 發(fā)布日期: 2020-10-10
  • 更新日期: 2025-07-04
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 E0105
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 浸潤性導(dǎo)管癌;女性
細胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 貼壁
物種來源
包裝規(guī)格
純度 詳見說明書%
是否進口

產(chǎn)品簡稱:BT-474 [BT474]細胞
中文名稱:人乳腺導(dǎo)管癌細胞

規(guī)格:瓶

種屬:人

來源:浸潤性導(dǎo)管癌;女性

培養(yǎng)基:1640

狀態(tài):貼壁

單位:

貨號:E0105

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

BT-474   [BT474]細胞

E0105

帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應(yīng)管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。

帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細胞復(fù)蘇
將凍存細胞從液氮中取出后,在37水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.
細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細胞狀態(tài)不佳,1:21:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:31:5細胞一代,即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度)進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細胞凍存
當(dāng)細胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80冰箱內(nèi)過夜。
*
天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。 
細胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:

Humanpituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  19-Nortestosterone acetate  中文名:19-去甲睪酮乙酸鹽  分子式:C20H28O3 

Humanpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  18-Hydroxytritriacontan-16-one  97191-42-9  中文名:  分子式:C33H66O2 

HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one  中文名:17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-  分子式:C26H30O3 

HumanPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  17α-Thevebioside  114613-59-1  中文名:  分子式:C36H56O13 

HumanPhosphorylatedacetylCoA,PaCoAELISAKit0酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  17α-Estradiol  中文名:17α-雌二醇  分子式:C18H24O2
熊果苷  Arbutin  質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR Humanai-rabiesvirusaibody,ai-RVELISA試劑盒人抗毒抗體(ai-RV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

氯化血根堿(標準品)  Sanguinarine chloride  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品 植物細胞色素C氧化酶活性測定試劑盒20

亞麻木酚素(標準品)  Secoisolariciresinol Diglucoside  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品 Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AIL-R1ELISAKit人相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

氨基丙二酸  Aminomalonic acid   質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 小鼠骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒 ,英文名: BSP ELISA Kit

AZD4547  AZD-4547  質(zhì)量規(guī)格:>98%,FGFR抑制劑 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA檢測試劑盒Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T

代森鋅  Zineb  質(zhì)量規(guī)格:>90% 人鼻病毒(RV)抗體(IgA)試劑盒 Human rhinovirus(RV)aibody(IgA)ELISA kit

雷公藤堿(標準品)  Wilforine  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品 RatVitaminA,VAELISAKit大鼠維生素A(VA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

新藤黃酸(標準品)  Neogambogic acid  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品 OXALATE(氨鹽)血液抗凝液100毫升

延齡草苷(標準品)  Diosgenin glucoside  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品 Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISA試劑盒豬樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

N-反式-對香豆酰酪胺(標準品)  N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品 小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒 ,英文名: CTX-2 ELISA Kit
OK
負鼠腎細胞 OK opossum kidney cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(粗顆粒)質(zhì)量規(guī)格:分類范圍3×100000Sephadex G-50

IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (Fc 標簽)L-(+)-扁桃酸;S-扁桃酸質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR(S)-(+)-Mandelic acid

MS751(人子宮頸表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2 Ana-1(巨噬細胞)利拉萘酯(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Liranaftate

MGC80-3(MGC-803)人細胞萘普生鈉質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BRNaproxen

GDNF Others Human GDNF 人細胞裂解液 (陽性對照) 萘普生鈉(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Naproxen
BT-474 [BT474]
細胞CL-0362HS 683(人腦細胞)5×106cells/瓶×2標準溶液(0.05000mol/L(0.1N))質(zhì)量規(guī)格:0.05000mol/L(0.1N)Iodine solution

DPP7 Others Mouse 小鼠 DPP7 / DPPII / DPP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 標準溶液(1000μg/ml,溶劑:水)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:水Iodine solution

小鼠成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL鈧標準溶液(1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3Scandium standard

BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細胞 BALB/3T3 clone A31 mouse embryo fibroblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBSL-羥基脯氨酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品L-Hydroxyproline

IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白L-羥基脯氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRL-Hydroxyproline
注意事項:
BT-474 [BT474]細胞1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
4)點燃酒精燈:注意火焰不能太小;
5)嚴格的無菌操作;
6)貼壁細胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
7)傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染;
8)傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。

 


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