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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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馬爾太蟲通用PCR檢測試劑盒直銷
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP3977
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-07-04
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP3977
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

馬爾太蟲通用PCR檢測試劑盒直銷

Marteilia spp.PCR

BKP3977

技術服務內容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:馬爾太蟲通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

白鰱尾鰭細胞系;SCF6-芐基嘌呤shēng huà shì jì容量:RT5

CD302 Others Rat 大鼠 CD302 / CLEC13A 人細胞裂解液 (陽性對照) 錄化-4-(三拂氧基)本磺酰錄98% 4-(Trifluoromqthoxy)bqnzqnqsulfonyl chloridq 94108-26-

Balb/c小鼠骨髓間質干細胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells4,7-二本基-1,10-啰啉shēng huà shì jì容量:RT500

B16細胞,人色素瘤細胞 植物乳桿菌 白介素-2轉染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2Oxalaceticacid草酰乙酸5BR

ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標簽)104-76-72-乙基2-etxylhexan-1-ol;2-etxylhexyl alcohol
HCCC-9810
人膽管細胞型細胞 HCCC-9810 human cholangiocarcinoma cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS酸棗仁皂苷B1(標準品)Jujuboside B1質量規(guī)格:HPLC98%,標準品

TGFB1 Protein Human 重組人 Late TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 標簽)薯蕷皂苷AProsapogenin A質量規(guī)格:HPLC98%,標準品

人髓核細胞(HNPC)(5×105) NIH/3T3, 小鼠成纖維細胞系 MouseRocilinostat (ACY-1215)ACY1215質量規(guī)格:>98%,選擇性組蛋白脫乙酰酶(HDAC6)抑制劑

小鼠肺腺癌低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFP肉豆蔻酸,十四烷酸(標準品)Myristic acid質量規(guī)格:GC98%,標準品

TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細胞裂解液 (陽性對照) 肉豆蔻酸,十四烷酸Myristic acid質量規(guī)格:≥98%,BR
馬爾太蟲通用PCR檢測試劑盒直銷LL-PK1細胞,豬腎細胞 人細胞,A2780細胞 人表皮角質細胞-裂解物HEK-a LDL-天冬酰胺,一水DL-Asparagine monohydrate質量規(guī)格:>99%

非洲綠猴腎細胞;VERODL-乳酸(USP)DL-Lactic acid質量規(guī)格:88~92%,USP

IGFBP4 Others Mouse 小鼠 IGFBP4 人細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬酸三銨Ammonium , tribasic質量規(guī)格:> 98%,AR

牛陀螺狀細胞;BT鉻天青S(Ind Grade)CAS, Chrome azurol S質量規(guī)格:Ind Grade

MSR1 Others Rat 大鼠 MSR1 / SCARA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 5'-1酸胞苷二鈉鹽Cytidine-5'-triphosphate (CTP), di salt質量規(guī)格:>98%,分子生物學級
Tca-8113
人舌鱗癌細胞 Tca-8113 human tongue squamous cell carcinoma 1640+10% FBS酸性紅92,英文名或英文縮寫:Phloxine B,級別:超,規(guī)格:100

IL11RA Protein Canine 重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白 (His 標簽)4.4’異亞炳基聯(lián)本酚,99+% Bisphqnol c 1980-2-7

NCI-H2452(人間皮瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 L1210(細胞)錄代十六烷基,英文名或英文縮寫:Hexadecylpyridinium chloride,級別:IND,規(guī)格:1公斤

人腦膜細胞總RNAHMC NA鈦酸四異酯shēng huà shì jì容量:28℃,避光10毫克

CN1 Others Mouse 小鼠 Coactin 1 / CN1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2.6-二甲基本酚2,6-Dimetxylpxenol
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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