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【產(chǎn)品名稱】: 支原體通用PCR檢測試劑盒直銷
【英文名稱】: Mycoplasma spp.PCR
【貨號】: BKP4065

【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

支原體通用PCR檢測試劑盒直銷其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

S100A4 Others Human 人 S100A4 人細胞裂解液 (陽性對照) 1基shēng huà shì jì容量：100克

T-112A胰凝乳蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL2-錄-5-溴 5-Bromo-2-chloropyridinq 23939-30-3

EGFR Others Mouse 小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 人細胞裂解液 (陽性對照) 脫脂奶粉shēng huà shì jì容量：RT1克

小鼠卵巢上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLDL-正纈酸100克

F98大鼠腦細胞 F98 rat glioma cells DMEM+10%FBSPeroxidase 10mg/100mg 國產(chǎn)
CL-0163MSTO-211H(人細胞)5×106cells/瓶×2芍藥苷(98%)Paeoniflorin質(zhì)量規(guī)格：>98%，高含量易分解

人細胞;NCI-H1650 大鼠嗅鞘細胞完全培養(yǎng)基 100mL5-羥基色氨酸,5-HTP5-Hydroxytryptophan質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,BR,L構(gòu)型

raw264.7 小鼠單核巨噬細胞細胞5-羥基色氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)5-HTP質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品,L構(gòu)型

CHST3 Others Mouse 小鼠 CHST3 / C6ST-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1酸卡巴拉汀Rivastigmine tartrate質(zhì)量規(guī)格：≥98%

小耳豬肺細胞;SEP-L11酸卡巴拉汀(標(biāo)準(zhǔn)品)Rivastigmine tartrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠瘤細胞(NK靶細胞);YAC-1雙甲脒標(biāo)準(zhǔn)溶液（10μg/ml,u=4%）Amitraz solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=4%

A2細胞，人 大鼠腎細胞,NRK-52E細胞 CL-0162MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2雙甲脒標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/ml,u=2%）Amitraz solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2%

U-2 OS(人細胞) 5×106cells/瓶×2Amberlite XAD7HP 離子交換樹脂(Mesh 20-60)Amberlite® XAD7HP質(zhì)量規(guī)格：Mesh 20-60

HAoAF-c 人主動脈外膜成纖維細胞(HAoAF) 500,000cells 腎動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Amberlite XAD-4 非離子型大孔樹脂(粒徑0.49 - 0.69 mm)Amberlite XAD4質(zhì)量規(guī)格：粒徑0.49 - 0.69 mm

腦動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)茴香1(分析標(biāo)準(zhǔn)品，用于萜1分析，≥99.5% (GC))trans-Anethole質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品，用于萜1分析，≥99.5% (GC)
支原體通用PCR檢測試劑盒直銷A549/DDP 肺腺癌/順鉑耐藥株鹽酸苯達莫司汀-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進口Bendamustine-d5 (major) Hydrochloride

HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯達莫司汀Bis-mercapturic 酸質(zhì)量規(guī)格：美國進口Bendamustine Bis-mercapturic Acid

體外管腔形成分析試劑盒IVTFA17-Oxo倍他米質(zhì)量規(guī)格：美國進口17-Oxo Betamethasone

STAT1 Others Human 人 STAT1 / p91 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 倍他米-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進口Betamethasone-d5

人非小細胞;NCI-H157苯扎氯銨（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法檢查用和容量法含量測定用Alkyldimethylbenzylammonium chloride
PCR檢測試劑盒

支原體通用PCR檢測試劑盒直銷 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。